产品信息

产品简介

PEG-8000慢病毒浓缩液（Lentivirus Concentration Solution）为5×浓缩液，能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速地浓缩。该浓缩液操作简单，仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育，然后使用普通离心机离心，即可获得浓缩的慢病毒颗粒，回收率高达90%以上，可提高100倍病毒滴度。

为了加速科研进程，江苑生物还提供基因敲降、敲除和过表达，以及科研实验外包等服务。

保存条件

4°C保存，1年有效。本产品为无菌液。

使用说明

1．收集慢病毒上清液，0.45 μm滤膜过滤，以除去细胞和碎片。                                      

注：若没有滤器，4℃，3500 g离心10 min亦可。尽量加入过滤步骤。

如果使用滤膜过滤，只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜（PES）膜，不能用硝酸纤维素膜（NC）。

若上清较多，可以1500 rpm离心5 min，将细胞及碎片离心到管底，再进行过滤，防止堵塞滤器。

过滤时，将注射器与滤器卡紧，轻柔推动活塞，防止用力过度造成滤器崩离注射器，使得病毒液四溅。

2．将慢病毒上清与浓缩液按照4:1的比例混合（上清液4份，浓缩液1份），4°C孵育过夜。刚开始时每隔30 min混匀一次，进行3 次。病毒沉淀过程中须保持4℃。

注：或者在混匀仪或摇床上低转速4℃混匀至少4 h或过夜。

若时间不宽裕，可将孵育时间缩短为4 h以上。慢病毒颗粒在4 °C可以稳定保存数天。

更长的孵育时间（如4℃过夜），有助于提高病毒回收率，但孵育时间不宜超过24 h。

3．于4°C，水平转子4000 g 离心30 min。

注：若使用角转子，病毒会被离心到管壁上，需仔细分辨管壁上的白色沉淀并将其冲洗下来。

4．小心去除上清，不要晃动管子，一般可见白色沉淀（有时沉淀不可见）。

5．用初始体积（原上清液体积）1/10 - 1/100的DMEM或PBS等重悬病毒颗粒，小心吹打均匀，重悬沉淀物。

注：如果看不到明显的白色沉淀，就在沉淀可能形成的区域用移液器小心吹打。

白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外，还有血清蛋白、少量的细胞碎片和基因组DNA等。

6．测定浓缩慢病毒样品的滴度，分装冻存于-80 °C冰箱。

注：病毒液切忌反复冻融，冻融一次病毒滴度将降低20-60%。

慢病毒滴度测定方法参考：江苑生物官网→新闻中心